<progress id="29hx4"><pre id="29hx4"></pre></progress>
    <rp id="29hx4"><object id="29hx4"></object></rp>

    <rp id="29hx4"><acronym id="29hx4"><input id="29hx4"></input></acronym></rp>

    <rp id="29hx4"><acronym id="29hx4"><input id="29hx4"></input></acronym></rp>
  1. <li id="29hx4"><object id="29hx4"></object></li>

    <form id="29hx4"></form>
  2. 新冠病毒核酸檢測如何避免“假陰假陽”?

    數字生命健康產業創新服務基因慧
    文章 | 菁良基因??編輯 | Shawne? 關鍵詞 | 核酸檢測

     

    最近,國藥集團新冠滅活疫苗(Vero細胞)和康希諾重組新冠疫苗(5型腺病毒載體)獲批上市,至此,國內已有4款新冠疫苗獲批上市,目前全球已有近10款新冠疫苗獲批上市。一些發達國家以高出本國人口幾倍的數量訂購新冠疫苗,而一些低收入國家尚無能力購買足夠的疫苗,這意味著即便有了疫苗,由于不同國家之間的接種率的不同,新冠病毒仍然會繼續存在。

    目前我國已經進入了疫情的防守期和最后撲滅階段,截至2021年2月9日24時,國內累計報告接種疫苗4052萬劑次,由于全國人口數量大,大部分人群還無法獲得新冠病毒免疫。新冠肺炎或將長期流行,病毒變得更加狡猾:新的病毒變種導致傳染性增加、無癥狀感染、超級傳染等情況都將給我們疫情防控帶來更大的挑戰。

    新冠病毒核酸檢測是新冠肺炎確診的金標準,但核酸陰性不代表真陰性,核酸陽性也可能是假陽性。

    新冠病毒核酸檢測為何會“假陰假陽”?

    ■?假陰性原因

    1.未規范采集樣本;

    2.不同的病期在不同的身體部位出現病毒的濃度會有差異,可能導致所采集的標本中沒有足夠量的病毒;

    3.樣本內的病毒含量未達到檢測試劑的檢測限;

    4.實驗室質量管理落實不到位,儀器設備性能、實驗人員是否規范操作、結果判讀和質量控制等都是影響檢測結果是否準確可靠的關鍵因素;

    5.若樣品保存、運輸條件不佳或存放時間過長,模板RNA容易降解;

    ■?假陽性原因

    1.擴增產物將標本或反應管污染;

    2.PCR 儀器的性能差異和溫控不準等質量問題造成非特異性擴增;

    如何避免新冠檢測的“假陰假陽”?

    ■?檢測規范化重要性

    目前截止2021年2月10日,國家食品藥品監督管理局已批準56個新型冠狀病毒檢測試劑盒上市,不同檢測試劑盒的靶序列設計不同。實驗室需明確所使用的假病毒質控品包含RT-PCR擴增試劑檢測的靶基因,因不同檢測方法學及試劑盒針對的基因及靶序列各異,推薦使用包含新冠病毒全基因組的質控品,確保所使用的質控品適用實驗室所采納的檢測技術及試劑盒

    參考國務院應對新冠肺炎疫情聯防聯控機制醫療救治組《關于加強外送樣本新冠病毒核酸檢測質量管理工作的通知》中進一步明確:“每批次檢測時,應當隨機放入至少1份弱陽性(1.5-3倍檢測限)和3份陰性室內質控樣本,進行質量控制,以及時發現問題,避免假陰性和假陽性”,進一步強化了新冠核酸檢測實驗室質量控制的要求。”

    為指導各地規范開展大規模新冠病毒核酸檢測工作,保障檢測效率和質量,有效控制新冠肺炎疫情,國家衛生健康委組織制定的《大規模新冠病毒核酸檢測實驗室管理辦法(試行)》中也明確規定:大規模檢測實驗室應當按照有關規定,每批次檢測時,隨機進行弱陽性和陰性室內質控,并定期參加國家或省級組織的室間質評。另外當大規模檢測實驗室出現以下情形時,衛生健康行政部門不再允許其承擔檢測任務:1.在質量監督過程中發現檢測不規范,可能影響檢測質量的;2.在檢測過程中未開展室內質控,未參加室間質評的;

    3.室間質量評價連續兩次以上不合格,經整改后仍不合格的;

    ■?樣本采集質控重要性

    樣本采集作為核酸檢測的第一步,其中涉及的采樣耗材和病毒保存液的質量保證對檢測結果的準確性至關重要,不合格樣本會直接影響檢驗結果。在新冠病毒核酸檢測中,不合格樣本通常是由于采樣問題和采樣用具問題導致的。

    合格的病毒保存液目前主要要求兩點:

    1.保證病毒的充分滅活,防止采樣、運輸和檢測過程的感染風險。

    2.保證病毒核酸(RNA)在采集、運輸過程中的穩定性,保證檢測結果的準確性,防止樣本運輸保存過程中降解導致檢測的“假陰性”。

    根據《ISO 15189:2012 醫學實驗室質量和能力認可準則》第5.3.2.3“試劑和耗材-驗收試驗”明確規定:影響檢驗質量的耗材應在使用前進行性能驗證,滅活型保存液對病毒核酸保存能力不同,除了廠家提供核酸保存能力性能報告之外,使用者應對所選擇的保存液進行性能驗證。

    《新冠病毒核酸檢測工作手冊(試行第二版)》中關于采樣管選擇要求:“人群篩查應選擇具有病毒滅活功能如含胍鹽(異硫氰酸胍或鹽酸胍等)或表面活性劑的采樣管。首選含胍鹽的采樣管。發熱門診或急診的快速檢測,則根據所用的核酸檢測試劑的要求確定采樣管。”

    工作手冊中對采樣管的要求主要考慮病毒的充分滅活(安全性),但是在滅活病毒的同時,我們還應考慮所選用的采樣管中的病毒保存液成分能否穩定保存病毒核酸的完整性,避免樣本中的核酸在檢測前降解造成“假陰性”。

    此外,如果病毒保存液中的成分會對后續的提取或PCR反應造成抑制,也有可能造成核酸檢測“假陰性”。

    因此,采樣環節的質控也需要引起行業關注。

    菁良基因COVID-19假病毒全基因組質控品

    菁良自去年疫情爆發以來第一時間就推出了新冠系列質控品,并一直不斷完善升級,此次推出的COVID-19 假病毒全基因組質控品,其產品形式為凍干珠,可以直接溶解于實驗室采樣管的病毒保存液或樣本釋放劑中,從采樣環節開始,實現真正意義的全流程質控。?

    行業內知名第三方醫學檢測公司為了驗證市場上主流采樣管的質量,通過使用菁良的COVID-19假病毒全基因組質控品做了相關對比實驗。將COVID-19假病毒全基因組質控品直接加入三個不同廠家生產的采樣管中,充分混勻后取200μL溶液進行提取和后續的RT-qPCR檢測,重復測試兩次取Ct值均值,結果顯示廠家C的實驗結果均為陰性,說明廠家C的產品不適用于2019-nCov核酸檢測流程的采樣環節。

    *ORF1ab、N基因和內參基因的Ct值均≤40時樣本檢測結果判讀為陽性

    ■?產品信息

    產品編號GW-CRBM001
    產品名稱COVID-19 假病毒全基因組質控品
    目標區域COVID-19病毒全基因組
    產品形式假病毒凍干珠
    產品規格10顆/盒或100顆/盒

    ■?更多產品特點

    覆蓋更全面的檢測區域:覆蓋病毒全基因組序列,可以適配市場上已獲批的新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒。

    凍干珠的產品形式更穩定:可以更好地保證假病毒結構和病毒核酸(RNA)的穩定性,運輸存儲的條件也更加便利(常溫下運輸,2-8℃保存,高溫(55℃)下可穩定保存長達1周)。

    質控品的拷貝數濃度可靈活配制:通過ddPCR精確定量2019n-Cov病毒基因組拷貝數,可根據不同實驗室使用的核酸檢測試劑盒的檢測限和弱陽性質控品的需求(1.5-3倍檢測限)參考配制特定拷貝數濃度的質控品溶液,用于核酸檢測的日常質控。

    病毒核酸檢測弱陽性:經驗證,菁良COVID-19假病毒全基因組質控品溶解后進行病毒RNA提取,分別使用5款獲證的市場主流RT-qPCR試劑盒檢測ORF1ab基因,各試劑盒檢測ORF1ab基因的結果為弱陽性(Ct值在33~37之間)。

    重視新冠病毒核酸檢測質量控制工作,使核酸檢測既保“量”又保“質”,才能為常態化疫情防控工作提供有力的技術支持。

    ?關于菁良基因?

    菁良作為國內分子診斷標準品研發生產商領跑者,擁有全球接受及使用范圍最大的標準品研發生產平臺,累積近千細胞系資源,能夠持續穩定地為用戶提供預期和滿意的合格產品。

    推薦閱讀
    分子生物實驗室中核酸標準物質(質控品)的管控和使用
    基因慧專訪菁良基因創始人李菁華博士
    基因行業簡報(第135期)
    【聲明】為傳播科學信息,推動基因及數字生命健康產學研連接,我們秉持中立、專業、賦能的理念收集、分析或發布信息。但由于時效性及行業特殊性,所刊登內容僅供研究參考,不作為決策依據;本文相關信息不代表基因慧機構的觀點;“基因慧”刊登的原創內容的知識產權為“基因慧”商標擁有者及相關權利人所有;歡迎轉載,轉載請申請并注明來源。歡迎個人及機構投稿及合作。

    版權所有,未經允許不得轉載。基因慧—數字生命健康產業內容平臺 » 新冠病毒核酸檢測如何避免“假陰假陽”?

    相關推薦

    搶沙發

    亚洲久久少妇中文字幕,亚洲国产初高中女,亚洲七七久久桃花综合影院,首页 图区 国产 亚洲 欧美